Ni-NTA

Magnetische Silikatpartikel (sicastar®-M) mit einem Durchmesser von 1,5 µm sind mit dem Nickel(II)-Nitrilotriessigsäure-Komplex (Ni-NTA) für die Bindung Histidin-gelabelter Proteine erhältlich.
Rekombinante Proteine, die ein 6xHistidin-Tag enthalten, können mittels Ni-NTA-Chromatographie gereinigt werden. Diese Reinigung basiert auf der Wechselwirkung zwischen Nickel(II)-Ionen auf der Partikeloberfläche und Histidin-Seitenketten des Proteins. Das immobilisierte 6xHistidin-Tag-Protein kann gewaschen und durch Zugabe von Imidazol oder EDTA bzw. durch Erniedrigung des pH-Wertes eluiert werden.

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Referenzen
  • S. Hughes, S. C. McBain, J. Dobson and A. J. El Haj, Selective activation of mechanosensitive ion channels using magnetic particles, J. R. Soc. Interface, 2008, 5(855–863;
  • R. Palankar, U. Binsker, B. Haracska, J. Wesche, A. Greinacher and S. Hammerschmidt, Interaction between the Staphylococcus aureus extracellular adherence protein Eap and its subdomains with platelets, International Journal of Medical Microbiology, 2018, 308(6), 683–691;