Ni-NTA

Magnetische Silikatpartikel (sicastar®-M) mit einem Durchmesser von 1,5 µm sind mit dem Nickel(II)-Nitrilotriessigsäure-Komplex (Ni-NTA) für die Bindung Histidin-gelabelter Proteine erhältlich.
Rekombinante Proteine, die ein 6xHistidin-Tag enthalten, können mittels Ni-NTA-Chromatographie gereinigt werden. Diese Reinigung basiert auf der Wechselwirkung zwischen Nickel(II)-Ionen auf der Partikeloberfläche und Histidin-Seitenketten des Proteins. Das immobilisierte 6xHistidin-Tag-Protein kann gewaschen und durch Zugabe von Imidazol oder EDTA bzw. durch Erniedrigung des pH-Wertes eluiert werden.

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Referenzen
  • Hughes, S., McBain, S.C., Dobson, J., and El Haj, A.J., Selective activation of mechanosensitive ion channels using magnetic particles, J R Soc Interface, 2008, 5, 855-63;